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<![cdata[人smoc1重组腺病毒载体的构建及其在主动脉瓣间质细胞中的表达]]>
tm vector system构建携带人smoc1基因的重组腺病毒表达载体,并感染人主动脉瓣间质细胞并检测外源性smoc1在细胞中的表达。方法：用pcr的方法扩增smoc1基因,将其克隆到pgem-t easy载体中并测序鉴定。经not i和xho i双酶切后接入pshuttle—cmv穿梭载体,构建重组腺病毒的穿梭质粒pshuttle—cmv—smoc1。将经pme i线性化的pshuttle-cmv穿梭载体与padeasytm dna电穿孔共转化bj5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒padeasy-smoc1,再将经pac i线性化的重组病毒骨架质粒转染hek293a包装细胞,包装并扩增重组腺病毒(ad-smoc1)。用ad-smoc1感染人主动脉瓣间质细胞,以western blot法和免疫荧光染色法检测smoc1在havics中的表达。结果：成功构建并包装表达smoc1蛋白的重组腺病毒,该重组腺病毒在体外能有效感染人主动脉瓣间质细胞并高表达smoc1蛋白,且其介导表达的smoc1蛋白主要定位于havics的胞浆和胞膜上。 结论：成功地构建了携带人smoc1基因的重组腺病毒,为研究smoc1在瓣膜间质细胞中的作用奠定了实验基础。]]>